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Mensaje 02 Mar 10, 13:17  16663 # 1



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Registro: 02 Mar 10, 13:13
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Hola gente!!

La verdad es que debe ser muyyy facil pero me veo en la siguiente situación=

He analizado carotenos por espectrofotometría y he hecho la sig extracción=

40 microlitros de muestra(plasma) + 240 microlitros de acetona. Esto da 1 disol de 280 microlitros total.
He centrifugado y he recogido 180 micrlitros del sobrenadante y he alicuotado 150 de estos 180 en pocillos para placas de ELISA.
La lectura del espectrofotometro es de 150 microlitros. Que factor de dilución debo aplicarle a las absorbancias/concentraciones que me dan el aparato para saber cual es la concentración real que tenia en mi muestra inicial de 40 microlitros?

Supongo que esta chupao pero necesito que me ayudeis!!!

Alguien me respondió lo sig= 150ul formados(40ul iniciales /280 ul formados)( 1 /180ul en pocillos)= 5/42.

Sin embargo no tiene mucho sentido puesto que si multiplico las aborbancias que me da el equipo por este factor (5/42), me dan concentraciones mas bajas en la muestra original de 40 microlitros que en los 150 finales de los pocillos. Y esto no puede ser...en teoría la muestra está + concentrada en 40 que en 150,no?

Ayuda!!!
          
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Mensaje 04 Mar 10, 13:33  16747 # 2


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Registro: 28 Oct 05, 00:18
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Mi nombre es: Andrés Jesús
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Nivel Estudios: Licenciad@
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Ciudad: Marbella (Málaga)
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______________________
Hola,

Mira si puede ser esto (si tiene lógica):

150ul formados (40ul iniciales /280 ul formados)( 180 /280)

Si lo ves correcto después te explico en qué me baso.


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